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熒光原位雜交(Fluorescence In Situ Hybridization,F(xiàn)ISH)技術(shù)是一種重要的分子生物學和細胞遺傳學技術(shù)。
原理:基于堿基互補配對原則,用熒光標記的核酸探針與細胞或組織中的核酸進行雜交。
探針類型:
1. 染色體特異性重復序列探針:用于檢測染色體的數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常。
2. 全染色體或染色體區(qū)域特異性探針:可識別整條染色體或染色體的特定區(qū)域。
3. 位點特異性探針:針對特定基因位點設計。
主要步驟:
1. 樣本制備:包括細胞培養(yǎng)、涂片制備、固定等。
2. 探針制備:對探針進行熒光標記。
3. 雜交:將探針與樣本在適當條件下雜交。
4. 漂洗:去除未結(jié)合的探針。
5. 檢測:在熒光顯微鏡下觀察熒光信號。
應用:
1. 醫(yī)學診斷:如腫瘤細胞的染色體異常檢測,輔助疾病診斷和分型。
2. 產(chǎn)前診斷:檢測胎兒染色體異常。
3. 遺傳學研究:研究基因在染色體上的定位和表達。
優(yōu)點:
1. 能在細胞水平上直觀顯示基因或染色體的位置和分布。
2. 相對快速、簡便。
總之,熒光原位雜交技術(shù)在臨床醫(yī)學和生物學研究中發(fā)揮著重要作用。
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